動(dòng)物實(shí)驗(yàn)檢測(cè)技術(shù)主要側(cè)重于科學(xué)和客觀地研究自然條件下的動(dòng)物行為,研究對(duì)象包括動(dòng)物的自主探索、學(xué)習(xí)行為、情緒表達(dá)等,是現(xiàn)代神經(jīng)科學(xué)研究的重要技術(shù)之一。
動(dòng)物實(shí)驗(yàn)檢測(cè)之高架十字迷宮測(cè)試
高架十字迷宮是評(píng)價(jià)嚙齒類動(dòng)物焦慮反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)方法,相較傷害性刺激所致小鼠焦慮行為檢測(cè)(如電刺激、噪聲刺激、飲食剝奪和暴露在捕食者氣味等),該實(shí)驗(yàn)具有操作簡(jiǎn)單的優(yōu)點(diǎn),能直觀反映小鼠的條件應(yīng)答。EPM實(shí)驗(yàn)是在高架Y型迷宮的基礎(chǔ)上發(fā)展而來(lái)的。EPM由開臂(openarms和閉臂(closedarms)各兩條組成,呈十字形交叉,交義部分為中央?yún)^(qū),距地面有一定高度。其原理是由于面對(duì)新事物開臂小鼠會(huì)產(chǎn)生好奇心去探究,而它們有嗜暗的天性(閉臂),兩者之間發(fā)生探究與回避的沖突行為,產(chǎn)生焦慮心理。整個(gè)迷宮距離地面的高度相當(dāng)于人類站在懸崖邊,易導(dǎo)致動(dòng)物產(chǎn)生恐懼不安的心理??梢酝ㄟ^(guò)對(duì)比小鼠在開臂和閉臂內(nèi)的滯留時(shí)間和路程來(lái)評(píng)價(jià)小鼠的焦慮行為。
高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)視頻分析系統(tǒng)為用戶提供了兩種跟蹤算法:灰度法和背景減法,穩(wěn)定可靠的頭、中、尾三點(diǎn)跟蹤算法,甚至可識(shí)別果蠅幼蟲等微小生物。實(shí)驗(yàn)開始時(shí)將小鼠從中央格面向閉合臂放入迷宮,記錄5分鐘內(nèi)的活動(dòng)情況。觀察指標(biāo)包括:開放臂進(jìn)入次數(shù)(必須有兩只前瓜進(jìn)入臂內(nèi)),開放臂停留時(shí)間,閉合臂進(jìn)入次數(shù),閉合臂停留時(shí)間。計(jì)算開放臂停留時(shí)間比例,開放臂進(jìn)入次數(shù)比例,高架十字迷宮中總進(jìn)入次數(shù)。實(shí)驗(yàn)完成后將小鼠取出,將兩臂清理干凈,噴灑酒精除去氣味,最后用Xeye動(dòng)物行為學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。
進(jìn)入開放臂次數(shù)及停留時(shí)間與大鼠的焦慮情緒成負(fù)相關(guān),進(jìn)入開放臂次數(shù)越少,停留時(shí)間越短,說(shuō)明老鼠的焦慮情緒越嚴(yán)重。
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