藥品:
二硝基苯磺酸(Dinitrobenzene sulfonic acid, DNBS)
動物:
雄性Sprague-Dawley大鼠
建模:
1. 新鮮制備15-30 mg DNBS/250μl 50%乙醇。
2. 將1毫升注射器連接到19G針頭上,針頭末端固定有聚乙烯導管。
3. 輕輕麻醉在加熱墊上的大鼠(1.5%異氟醚,動物仍保持清醒、眨眼和吞咽反射,并顯示有規(guī)律的呼吸)。
4. 用指尖輕輕按壓動物的后端,清除遠端結腸中可能存在的任何糞便。
5. 輕輕地將導管插入直腸內,到達肛門近端約8 cm。插入導管時加入少量溶液進行潤滑,以便于插入。
6. 緩慢注射250μl DNBS,或等量50%乙醇作為對照。注入DNBS后,動物頭朝下90秒。
7. DNBS給藥后,在第一周給動物喂食8%蔗糖水和0.2%鹽水,以防止脫水。
8. 仔細觀察動物,在實驗期間每天監(jiān)測體重、脫水、痛苦等的跡象。
模型評估:
結腸損傷的病理評分