TUNEL檢測

簡要描述：TUNEL(TdT-mediated DUTP nick end labeling)細胞凋亡檢測試劑盒是用來檢測組織細胞在凋亡早期過程中細胞核DNA的斷裂情況。

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詳細介紹

TUNEL染色操作方法：

（1）固定：將細胞爬片用0.02M PBS洗去培養(yǎng)基，再用4%甲醛固定30min，0.02M PBS洗3min×3次。

（2）消化：將細胞爬片浸入胰蛋白酶內(nèi)消化40分鐘，PBS洗3min×3次。

（3）制備TUNEL反應混合液，用50μl TdT+450μl 熒光素標記的dUTP液混勻。

（4）加50μl TUNEL反應混合液于細胞爬片上，在暗濕盒中反應37℃反應1h；PBS洗3min×3次。

（5）加50ul POD于細胞爬片上，在暗濕盒中反應37℃×30min，PBS洗3min×3次。

（6）DAB染色3-10min，自來水沖洗，蘇木素復染， 1%鹽酸酒精分化，顯微鏡下觀察，控制染色程度。

（7）脫水：75%酒精、85%酒精、95%酒精、100%酒精，逐級脫水、各3min。

（8）透明：二甲苯透明3min×2次。

（9）中性樹膠封片。

（10）通過顯微鏡采集分析樣本相關部位，計算凋亡率。

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