簡要描述:通過非病毒方法將核酸引入真核細胞的過程定義為轉(zhuǎn)染。使用各種化學,脂質(zhì)或物理方法,該基因轉(zhuǎn)移技術是在細胞背景下研究基因功能和蛋白質(zhì)表達的有力工具。將外源物質(zhì)導入細胞的方法主要包括脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染(瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染),電轉(zhuǎn)或者病毒感染。病毒載體是進行真核細胞基因工程、真核基因轉(zhuǎn)染的有力工具。
服務分類
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常規(guī)轉(zhuǎn)染技術可分為兩大類,一類是瞬時轉(zhuǎn)染,一類是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。
一、瞬時轉(zhuǎn)染
服務介紹:
通過脂質(zhì)體介導轉(zhuǎn)染法基因轉(zhuǎn)染技術,將靶基因?qū)爰毎话阍谵D(zhuǎn)染后48小時左右,靶基因即可在細胞內(nèi)表達。根據(jù)不同的實驗目的,48小時后即可進行靶基因表達的檢測等實驗。觀察目的基因及其表達蛋白在某種細胞中的功能(短時間即可進行觀察,但效應會很快丟失)。
客戶提供:
1、構建好的外源基因載體,或由本公司進行載體構建(需提供目的基因名稱、種屬、序列或Gene Accession Number)。
2、待轉(zhuǎn)染的細胞系(1×106個細胞,可傳代,倍增時間小于48小時)以及細胞培養(yǎng)條件的說明。
3、若需要檢測靶基因的表達,需提供相應抗體或由公司代購。
交付內(nèi)容:
1、構建好的瞬時轉(zhuǎn)染細胞。
2、實驗報告:詳細實驗步驟及相關的外源基因表達分析。
二、穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞株的構建
服務介紹:
穩(wěn)定轉(zhuǎn)染,就是轉(zhuǎn)染的質(zhì)粒DNA整合到宿主細胞染色體上,使宿主細胞可長期表達目的基因及蛋白。需要在瞬時轉(zhuǎn)染基礎上對靶細胞進行篩選或者應用高轉(zhuǎn)染效率的病毒,根據(jù)不同基因載體中所含有的抗性標志選用相應的藥物進行細胞傳代,從而得到可穩(wěn)定表達目的基因的細胞系。
客戶提供:
1、構建好的外源基因載體,或選擇由公司構建(價格參考載體構建)。
2、待轉(zhuǎn)染的細胞系(1×106個細胞,可傳代,倍增時間小于48小時)以及細胞培養(yǎng)條件的說明。
3、提供相應抗體
交付內(nèi)容:
1、構建好的穩(wěn)定表達細胞系。
2、實驗報告:詳細步驟、相關的外源基因表達分析等。
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